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[法医资料] 血迹检验漫谈

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发表于 2009-6-3 21:57:18 | 显示全部楼层 |阅读模式 来自 广东省广州市番禺区 电信

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血迹检验,是最常见的法医物证检验之一。它通常可以解决是不是血迹,是人血还
是动物血,属何种血型,是男人血还是女人血,以及出血部位、出血时间和出血量等问
题,从而可以为侦查、审判提供重要的线索和依据。法医物证检验,既可以是对人体中
抽取的新鲜血液进行的血液检验,也可以是对干燥后的血块或斑痕进行的血迹检验。这
里我们主要介绍血迹检验。
    为了保证检验得以顺利进行,血迹检验通常采取肉眼检查、须备试验、确证试验、
种属试验、血型测定、性别检验和出血部位检验等的顺序。
    一、肉眼检查
    肉眼检查是要发现血迹,观察其颜色、形态和部位,以便为下一步的检验做好准备
和打下基础,并为确定案件性质,分析判断案情提供帮助。
    在杀人、伤害等暴力性案件中,现场物体上、被害人和罪犯身上都可能留有血迹。
一般说来,血迹比较明显可见,并不难发观,但有时却需要仔细检查寻找才可能发现。
    新鲜血液的颜色为鲜红色,流出体外后由于血红蛋白的变化而逐渐变为暗红色、暗
褐色,陈旧或经温热过的血迹,呈灰褐色,腐败血迹呈淡绿色或绿色。血迹如果附着在
深色物体上,颜色不明显。酱油、油漆、果汁、色素染料、被锈等斑迹,其颜色也可与
血迹的颜色相似,应注意区别。
    血迹因形成时的条件不同,形状各异,大致有这么几种类型:
    1.滴状血迹
    血液垂直滴落在地面或物体上,形成圆滴状血迹。其具体形状又因滴落的高度和运
动方向的不同而有区别。如果血液从0.1米以内的高度落下来,血迹边缘呈完整的圆状;
从0.5米左右的高度落下时,圆点边缘可有明显的锯齿状;从1米以上商度落下时,圆点
边缘不仅可见锯齿状,而且圆点周围往往有逗点状或线状小血滴。如果血液在受伤者行
进的或从运动的物体(如车辆)上滴落,血迹呈椭圆形,一端似星芒状突起,突起的尖端
指向运动的方向。
    2.喷溅状血迹
    动脉血管破裂,由于心脏收缩产生的压力和动脉血管壁的回缩弹力作用,血液喷射
而出,在附近物体上形成状似惊叹号的喷溅血滴,其尖端指向喷溅方向。若用钝器重复
打击而受伤出血,也可形成喷溅血迹,但其大小、形状不一,分布分散。
    3.流柱状血迹
    血液从创口流出,沿着身体或其他物体由高向低往下流,形成上薄下厚,上淡下浓
的条状血迹。
    4.擦拭状血迹
    染有血液的物体或创口与其他物体接触,并发生移动和摩擦,可以形成面积较大,
浓淡不均的擦拭状血迹。
    5.接触状血迹
    染有血液的物体或创口与其他物体接触,未发生移动或摩擦,可以留下血印痕迹,
如血手印、血脚印。接触状血迹能反应出染血物体或创口的外表形象特征。
    6.血泊
    血液大量流出,聚集成片,就可以形成血泊。血泊所在地常常就是受伤或被杀的第
一现场。
    此外,注意查看血迹遗留的位置和部位,有助于分析被伤杀者受伤时或临死前的活
动情况和当时所处的位置、姿势。
    二、预备试验
    该试验为初步的、试探性的血迹检验,目的是为了解决有无血迹存在的可能性。预
备试验方法简便,灵敏度高,但特异性差。阳性结果,只能证明检材上有血迹存在的可
能性,而不能肯定就是血迹。当然该试验的阴性结果,可以排除有血迹存在的可能,也
就不必再进行下一步的检验了。
    血迹预备试验的方法很多,常见的有联苯胺试验、酚酞试验、氨基比林试验、鲁米
诺发光试验、紫外线检查等。
    1.联苯胺试验
    本试验灵敏度极高,只需微量检材即可进行。试验时,取少量检材,放置在白色滤纸或白磁板上,然后依次滴入冰醋酸,联苯胺无水酒精饱和溶液和3%的过氧化氢各一滴。如果检材上有血迹存在,就会出现翠蓝色反应,但这种反应其他物质也可能出现,并非血迹所特有。因而,该试验若成阳性反应,只能说明检材上可能有血迹。
    2.紫外线检查
    血迹在紫外线照射下呈土棕色反应,因而,利用紫外线进行检查,可以鉴别有无血
迹存在的可能。
    3.酚酞试验
    与联苯胺试验一样,该试验的灵敏度也非常高。试验时,取少量检材置白磁板上,用蒸馏水浸湿检材,加还原酚酞试剂和3%过氧化氢各一滴,如是血迹,立即出现红色。
    4.鲁米诺发光试验
    鲁米诺是一种人工合成的有机化合物,早在1853年就被合成出来了。到了1928年,化学家首次发现这种化合物有一个奇妙的特性,它被氧化时能发出蓝光。几年以后,就有人想到利用这种特性去检测血迹。血液中含有血红蛋白,我们从空气中吸入的氧气就是靠这种蛋白质输送到全身各部分的。血红蛋白含有铁,而铁能催化过氧化氢的分解,让过氧化氢变成水和单氧,单氧再氧化鲁米诺让它发光。这种检测方法极为灵敏,能检测只有百万分之一含量的血,即使滴一小滴血到一大缸水中也能被检测出来,由此可知犯罪分子是多么难以把现场清洗干净了。  

  明白了鲁米诺发光的道理,就会知道这种检测方法其实并不那么可靠,。既然鲁米诺发光是氧化导致的,这就意味着有很多氧化物以及能起催化作用的金属也能让鲁米诺发光,这其中包括日常使用的次氯酸漂白剂。如果犯罪分子用漂白剂清洗过现场,就有可能干扰鲁米诺的使用。这两种发光情况略有不同,漂白剂导致的发光是快速闪现的,而血迹导致的发光是逐渐出现的。有经验的侦探通常能对二者做出区分,不过也不一定都能做到。  

  怎么办呢?可以采取几种办法,一种是让现场干燥几天,漂白剂的干扰作用就会消失,而血迹即使过了许多年,还能让鲁米诺发光。另外一种办法是使用某种能抑制次氯酸的干扰作用的化合物。很显然不能使用抗氧化剂,因为那会把血迹与鲁米诺的反应也抑制住了。人们针对次氯酸的化学结构,例如针对它含有的氯原子,找到了合适的抑制物。最保险的办法是在用鲁米诺发光法检测到疑似血迹的物质后,用别的方法确定那的确是血迹。人们发现,血迹在被鲁米诺处理过以后,它含有的遗传物质DNA并没有被破坏掉,还能从中提取出来做鉴定。这样就几乎万无一失了。  
    三、确证试验
    经过预备试验,如果检材呈阳性反应,说明有血迹存在的可能性,需进一步进行确
证试验,以明确是不是血迹。与预备试验相反,确证试验特异性强,但灵敏度较低,如
果检材条件差,如经日晒雨淋、混有杂质或已腐败的血迹,则难以出现阳性反应。因而
确证试验的阳性结果可以肯定为血迹,阴性结果却不能完全排除血迹存在的可能性。
    确证试验的方法也很多,如血色原结晶试验、氯化血红紫结晶试验和光谱检查等。
    1.血色原结晶试验
    血迹中的血红蛋白,在碱性溶液中分解成正铁血铁素和变性珠蛋白,再与还原剂作
用,正铁血红素还原成血红素,与变性珠蛋白或者其他含氮化合物结合可生成血色原结
晶。根据这一原理进行试验,利用血色原结晶出现情况就可以确定是否血迹。试验时,
先用10%氢氧化钠水溶液3毫升,吡啶3毫升和30%葡萄糖水溶液l0毫升混合配制成试剂。
取少量检材,置于载玻片上,加所配试剂1—2滴,盖上盖玻片,梢加热至冒小气泡,冷
却后镜检。如为血迹,可出现樱红色针状、菊花状或星状血色原结晶。
    2.氯化血红素结晶试验
    血液中血红蛋白用酸作用破坏球蛋白,生成正铁血红素,与冰醋酸、氯化钠作用,
则生成游离氯,正铁血红素与游离氯作用生成褐色菱形氯化血红素结晶。根据达一原理,
试验时,先用10%氯化钠溶液2毫升,冰醋酸10毫升和无水酒精5毫升配制试剂,取检材
少许,置于载玻片上,加试剂1—2滴,盖上盖玻片,稍加热,待冷却后镜检。如系血迹,
可见到褐色菱形结晶。
    3.光谱检查
    日光通过有色液体时,其中某种波长的光线被吸收,在光谱上出现条状阴影的吸收
线。血迹中血红蛋白及其衍生物均为有色物质,有很强的选择吸收光谱的性能,具有特
定的吸收线。根据这一特性,用显微分光镜检查,可以鉴别是否血迹。光谱检查,灵敏
度高,简便易行。
    四、种属试验
    经过预备试验和确证试验确定为血迹后,还需要鉴别其种属,确定是人血还是动物
血。
    血迹种属试验的方法也很多,如沉淀反应、琼脂扩散试验、对流电泳试验、抗人球
蛋白消耗试验、纤维蛋白板试验、胶乳颗粒凝集试验和红细胞凝集试验等。
    1.沉淀反应
    人和各种动物的蛋白质都具有种属特异性,将种属不同的蛋白质分别注射入家兔体
内,在家免的血清中就会产生对所注射的蛋白质起特异反应的物质。这种物质再与相应
的蛋白质作用,就会发生沉淀反应,出现白色沉淀环。通常我们把血清中这种起特异反
应的物质叫着抗体,把注入的蛋白质叫作抗原,能与抗原发生沉淀反应的抗体血清叫免
疫血清或沉淀素血清。免疫血清中的抗体只与相应的抗原发生沉淀反应。例如,注入人
体蛋白质获得的抗人免疫血清,只与人体蛋白质发生沉淀反应,而不与动物蛋白质发生
沉淀反应。同样,注入某类动物(如猪、牛、羊等)蛋白质获得的抗该类动物免疫血清,
也只与该类动物蛋白质发生沉淀反应,而不与人或其他动物的蛋白质发失沉淀反应。
    根据这一现象,我们就可以通过制取免疫血清来鉴别血迹的种属。试验时,将检材
浸出液与抗人免疫血清重叠,如果呈阳性反应,即在检材浸出液与抗人免疫血清之间的
接触面上生成白色沉淀环,便可证明是人血。同样要确定检材是何种动物的血迹,就用
各种抗动物免疫血清与检材浸出液相作用,看是否发生沉淀反应,以此来推断种属。
    2.琼脂扩散试验
    试验时,先用琼脂在玻璃板上制成琼脂板,在琼脂板中央打一小洞,距此洞周围
1.5厘米处,再打上数个小孔。将检材浸出液注入中央洞穴内,再在周围小孔内分别注
入抗人免疫血清和对照液。如是人血,则盛有检材浸出液和抗人血清的两洞孔之间,经
过扩散就会形成一条白色沉淀带。
    五、血型测定
    测定血型是血迹检验中最主要的检验项目之一,人体血液中含有各种血型物质,可
以用来测定血型。法医实践中,如前所述,血型种类很多,目前最常进行的是ABO系统
血型和MN系统血型的测定。
    1.ABO系统血型的测定
    红细胞中抗原(凝集原)与血清中相应的抗体(凝集素)结合,如A抗原和抗A抗体相结
合,红细胞会发生凝集反应,凝集成块状或颗粒状。根据这种凝集反应就可以判定血型。
例如,用预先制备的抗A、抗B标准血清,分别与检材稀释液结合,如果检材与抗A血清
结合后红细胞发生凝集,而与抗B血清结合后,红细胞不发生凝集,即可证明检材红细
胞中含有A凝集原,检材为A型血;如果与抗A血清结合后红细胞不发生凝集,与抗B血清
结合后,红细胞发生凝集,说明检材红细胞中含有B凝集原,检材为B型血;如果分别与
抗A、抗B血清结合后,红细胞都发生凝集反应,说明检材红细胞中含有A、B两种凝集原,
检材为AB型血;如果与抗A、抗B血清结合后,红细胞都不发生凝集,说明检材红细胞不
含A、B凝集原,检材则为O型血。
    血迹ABO系统的测定方法主要有两种,一种叫凝集素检验法,即通过检验血迹中有
无抗A、抗B凝集素来确定血型。另一种叫凝集原检验法,即通过检验血迹中有无A、B凝
集原来测定血型。
    (1)凝集素检验法:将检材分为两等份,分别置于栽玻片上的A、B两端。用0.1%的
A型红细胞悬液1滴滴在A端检材上,用0.1%B型红细胞悬液1滴滴在B端检材上,盖上盖
玻片。再镜检看有无红细胞凝集反应。如果A端检材出现红细胞凝集反应,证明检材中
有抗A凝集素,检材可判定为B型血迹;B端检材出现红细胞凝集反应,说明检材中有抗B
凝集素,检材可判定为A型血迹;如果A、B两端均凝集,证明检材中含有抗A、抗B两种
凝集素,检材为O型血迹;如果A、B两端均不发生凝集,表明检材中无凝集素或者已被
破坏而无法检出,检材或者为AB型血迹,或者无法判定。
    凝集素容易受到外界条件的破坏,因此,该检验法只适用于血液和新鲜血迹的血型
测定。
    (2)凝集原检验法:它是通过验凝集原的有无来测定血型的一种方法。由于凝集原
保存时间轻长,一般不易破坏,因此,要测定陈旧血迹的血型,可用凝集原检验法。这
一检验通常采用吸收试验、热解离试验和混合凝集试验三种方法来进行。
    第一、吸收试验:红细胞凝集原与血清中相应的凝集素相结合时,前者能使后者被
吸收而减少或者消失。如A凝集原吸收坑A凝集素,B凝集原吸收抗B凝集素。但是,这种
吸收只能是相应的凝集原与凝集素之向的吸收,而不能在不同的凝集原和凝集索之间吸
收。如A凝集原就不能吸收抗B凝集素,B凝集原就不能吸收抗A凝集素。根据这种吸收现
象,可以测知检材的血型。
    试验时,将检材一分为二,分别浸泡在抗A、抗B标准血清中,让检材与血清充分结
合后,将浸泡液稀释,再分别加入A型、B型红细胞悬液去探测稀释液中有无抗A、抗B凝
集素存在,是否已被捡材凝集原吸收而消失。检材被抗A凝集素血清浸泡稀释后,再加
入A型红细胞悬液,如果红细胞发生凝集反应,说明抗A凝集素没有被捡材吸收,检材中
无A凝集原,因而检材不是A型血;如果红细胞不发生凝集,说明抗A凝集素已被检材吸
收,检材中有A凝集原,因而检材可判定为A型血迹。余此可以类推,吸收试验结果可靠,
但所需时间较长,检材需要量较大,不宜用作微量血迹的检验。
    第二、热解离试验:试验时,让血迹中凝集原分别与抗A、抗B血清中的凝集素结合
后,清除未被吸收的凝集素,加热至55~56℃,被吸收的凝集素又可解离出来。再加入
A、B型红细胞悬液,观察有无凝集反应。如果加入A型红细胞悬液而发生凝集反应,说
明检材中含有A凝集原,血型为A型。加入B型红细胞悬液而发生凝集者,说明检材中含B
凝集原,血型为B型。均凝集者,说明检材中含A、B两种凝集原血型为AB型。均不凝集
者,证明检材中不含A、B凝集原,血型为O型。
    该试验灵敏、迅速,所需检材量少,但技术条件要求高,操作规程严格。
    第三、混合凝集试验:本试验采用双重结合的办法,让检材中凝集原与血清中抗A、
抗B凝集素充分结合后,清除游离血清,再加入相应的A型、B型红细胞悬液,则悬液中
的红细胞与已结合的抗A、抗B血清重新结合,出现红细胞凝集或吸附反应。如果加入的
是抗A血清和A型红细胞悬液,检材出现这种反应,说明检材为A型血迹。如果加入的是
抗B血清和B型红细胞悬液,出现这一反应,说明检树为B型血迹。而无论加入抗A血清和
A型红细胞悬液,还是加入抗B血清和B型红细胞悬液,都出现这一反应,检材为AB型血
迹。都不出现反应,检材为O型血迹。
    2.血迹MN系统的血型检验
    血型测定,一般先进行ABO系统血型测定,再进行MN系统血型测定。MN血型测定的
方法与ABO血型测定的方法基本相同。先制备抗M、抗N血清,检验时,用抗M、抗N血清
分别浸泡检材,再将浸泡液稀释,根据稀释液中抗M、抗N抗体被吸收的情况来测定血型。
如果抗M抗体被吸收而消失,说明检材中有M凝集原,检材为M型血迹,若抗N抗体被吸收,
检材为N型血迹。都被吸收,检材为MN型血迹。
    六、血迹的性别检验
    人类细胞核中有23对染色体,其中有一对为性染色体。正常女烛的性染色体为XX,
正常男性的性染色体为XY。根据性染色体的这种差异,可以区分性别。血液白细胞核内
存在有性染色质,根据检材中X、Y染色质的检出率,可以判定检材是女人血迹还是男人
血迹。
    血迹性别检验的方法,主要有两种:X染色质检出法和Y染色质检出法。其中以Y染
色质检出法或两种并用法获得的检验结果较为可靠。
    血迹检验除以上六个方面的项目外,有时根据案情需要,还须对出血部位、血迹新
旧程度和出血量等进行检验和判断
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